Quin és el propòsit de l’anticòs primari en una transferència Western?
Quin és el propòsit de l’anticòs primari en una transferència Western?

Vídeo: Quin és el propòsit de l’anticòs primari en una transferència Western?

Vídeo: Quin és el propòsit de l’anticòs primari en una transferència Western?
Vídeo: Francis Cousin : Paris 1871, Kronstadt 1921... Contre toutes les gauches du Capital ! 2024, Setembre
Anonim

Amb el mètode de detecció directa, es conjuga un enzim o fluoròfor anticòs primari S'utilitza per detectar l'antigen d'interès a la borró . En el mètode de detecció indirecta, un no etiquetat anticòs primari s’utilitza per primer cop per unir-se a l’antigen.

A més, què és l’anticòs primari en Western blot?

El anticòs primari reconeix i lliga l'epítop o la seqüència específica d'aminoàcids de la proteïna d'interès. Secundària anticossos usat per Western Blot normalment es conjuguen amb un enzim; els enzims més utilitzats són la peroxidasa de rave de cavall (HRP) i la fosfatasa alcalina (AP).

A més, què fa l’anticòs principal? Els anticossos primaris són immunoglobulines que s’uneixen a un antigen específic ( proteïna , pèptid, molècula petita, etc.) d’interès i normalment no són conjugats. Un bon anticòs primari reconeix i s’uneix amb alta afinitat i especificitat per purificar, detectar i mesurar l’antigen.

En conseqüència, quin és el propòsit d’una transferència Western?

A western blot és un mètode de laboratori utilitzat per detectar molècules de proteïna específiques entre una barreja de proteïnes. A continuació, les molècules de proteïnes es separen segons les seves mides mitjançant un mètode anomenat electroforesi en gel. Després de la separació, les proteïnes es transfereixen del gel a un assecat membrana.

Com s’utilitzen els anticossos en la transferència Western?

Anticossos són usat per detectar proteïnes diana al western blot (immunoblot). El anticossos es conjuguen amb etiquetes o enzims fluorescents o radioactius que donen una reacció posterior amb un reactiu aplicat, donant lloc a una coloració o emissió de llum, que permet la detecció.

Recomanat: